مناقشة اطروحة دكتوراه في كلية التربية للعلوم الصرفة

ناقشت كلية التربية للعلوم الصرفة بجامعة ديالى أطروحة الدكتوراه الموسومة ( تقييم دور تعدد الأشكال الوراثية والمناعية لجزيئات الالتصاق الخلوية الوعائية ICAM-1,VCAM وعامل النخر الورمي الفا TNF-a في مرض التهاب المفاصل الرثوي) وعلى قاعة الندوات والمؤتمرات
تضمنت الأطروحة التي تقدمت بها الباحثة أسيل جواد كاظم بأشراف الأستاذ الدكتور عمار احمد سلطان ، التهاب المفاصل الروماتويديRheumatoid arthritis (RA) ،هو مرض التهابي مناعي ذاتي يصيب الغشاء الزليلي للمفاصل، ويصيب الإنسان نتيجة لعدّة عوامل أهمها العوامل الوراثية أو تعدد أشكال الجينات، والإلتهاب الناجم عن الاستجابات المناعية المسببة للأمراض والعوامل المعدية، والمناعة الذاتية لمكونات الغشاء الزليلي والغضاريف، والتداخل في إنتاج السيتوكينات المسببة للالتهابات، وتحويل الخلايا الزلالية إلى خلايا مستقلة تغزو الأنسجة .
هدفت هذه الدراسة إلى تقييم تعدد الأشكال الجينية لجيناتVCAM-1 وICAM-1 وTNF-α، وتقدير تركيزات VCAM-1 و ICAM-1 في المصل، وقياس مستويات IL-39 وIL-37 في المرضى الذين يعانون من RA ومجموعة السيطرة ، إجريت الدراسة الحالية على مجموعة من المرضى RA المراجعين للعيادات الاستشارية في مستشفى بعقوبة التعليمي/ محافظة ديإلى، ومستشفى بغداد مدينة الطب. جمعت عينات الدم لـ 50 مريضًا مصابًا RA تتراوح أعمارهم بين 20 و75 عامًا ، و38 فردًا سليمًا(مجموعة السيطرة) ،تتراوح أعمارهم بين 20 و60 عامًا. وبمقارنة نتائج الخصائص الديموغرافية والسريرية، في حالة الجنس لوحظ وجود فروق معنوية في مجموعة المرضى5(10%) ذكور، و45 (90%) إناث، بينما في مجموعة السيطرة 10 (26.31%) ذكور و28 (73.68%) إناث. ووجدت الدراسة أن أعلى معدل إصابة كان 56% في الفئة العمرية 41-60 سنة ، وأقل معدل إصابة كان 16% في الفئة العمرية <61 سنة، مع عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية (P>0.805) بين المجموعتين.
كما وجدت الدراسة فروقًا معنوية (P ≤ 0.006) بين المرضى الذين لديهم تاريخ عائلي ومن ليس لديهم تاريخ عائلي، إذ كان لدى 18% تاريخ عائلي و82% من دون تاريخ عائلي، وكان لدى المدخنين معدل إصابة أقل بالمرض (14%) مقارنة بغير المدخنين (86%)، مع وجود فروق معنوية (P ≤ 0.001) . فضلاً عن ذلك، لم تجد الدراسة أي فرق معنوي كبير (P ≥ 0.001) في مؤشر كتلة الجسم بين مجموعات الدراسة . وأظهرت النتائج أيضًا أن معدل الإصابة بالمرض يختلف اختلافًا كبيرًا بحسب مدة المرض، إذ كان أعلى معدل لدى (28) مريضًا، بمدة تتراوح من 1-10 سنوات (56٪)، والثاني لدى (17) مريضًا بمدة تتراوح من 10-19 سنة (34٪)، والثالث لدى (5) مرضى بمدة تتراوح من 20-30 سنة (10٪). كما تبين وجود فروق ذات دلالة إحصائية عالية بين مجموعات المرضى وفقًا لدرجة نشاط المرض -28 ،إذ كان لدى (37) مريضًا معدل معتدل بنسبة 74٪،(9) مرضى معدل مرتفع بنسبة 18٪ و(4) مرضى معدل منخفض بنسبة 8٪. وفضلاً عن ذلك، ركزت الدراسة على التسلسل الجيني لجينات TNF-α، وجينVCAM-1، وجين ICAM-1. ووجدت الدراسة تباينًا وراثيًا في موقع المتغايرrs1800610 G>A في جين TNF-α في كل من مرضى RA والسيطرة، إذ بينت الدراسة أن النمط الجيني GG والأليل G هما أعلى كعامل خطر(7.36، 9.15)، بينما انخفضت نسبة النمطين الجينيين AA وGA وسجل الأليل A نسبة خطورة (0.11) وبهذا عدُ كعامل وقائي من الإصابة بالمرض.
فضلاً عن ذلك ، وجدت الدراسة تباينًا وراثيًا آخر rs3170794 T > C في موقع الحفاز لجينVCAM-1 في مرضى RA والسيطرة، إذ كان للنمط الجيني CC والأليل C أعلى نسبة عامل خطر (3.60، 3.55) وتم عدهُِ نمطًا وبائيًا للاستعداد الوراثي على الإصابة بمرض RA، في حين كان النمط الجيني CT (0.28) منخفضاً وبهذا عدٌ كعامل وقائي للمرض.
كما وجدت الدراسة تباينًا وراثيًا آخر rs34199378 A>Gعند الموقع المتغاير في منطقة 6-Exon لجين VCAM-1 في مرضى RA والسيطرة، إذ كان للنمط الجيني AA والأليل A أعلى نسبة خطورة (1.31، 1.18) وبذلك يعدُّ عاملًا وبائيًا للاستعداد الوراثي على الإصابة بمرض RA ، في حين كان النمط الجيني المتباين GA بنسبة خطورة منخفضة(0.76) وبذلك يُعتبر وقائيًا، وبالمقابل لم يظهر النمط الجيني GG في أي من مجموعتي الدراسة.
كما وجدت الدراسة تباينًا وراثيًا rs868375367 G>C في منطقة 5- Exon لجين ICAM-1 في مرضى RA والسيطرة . أذ كان النمط الجيني المتباين GC أعلى نسبة عامل خطر (6.10) وتم عدهَّ نمطًا وبائيًا RA ، في حين كان النمط الجيني GG والأليل G نسبة خطر(0.16، 0.34) وتم عدَّهما وقائيين، في حين النمط الجيني CC كان غائبًا في كلتا مجموعتي الدراسة.
فضلاً عن ذلك، وجدت الدراسة تباينًا وراثيًا آخر rs5498 A>G من 6-Exon في جينICAM-1 في مرضى RA والسيطرة. أذ كان للنمط الجيني AA والأليل A أعلى نسبة عامل خطر (1.71، 1.35)، وتم عدهَّ عامل خطر في RA ، في حين كان النمط الجيني GG والأليل G (0.80، 0.74) لجينICAM-1 منخفضًا وعد كعامل وقائي .
من الجانب الأخر للدراسة المناعية، أشارت النتائج إلى وجود زيادة معنوية (P≤0.0001) في معدل ESR وتركيز CRP في عينات دم المرضى مقارنة بالأفراد بالسيطرة، وكانت القيم في المجموعة السيطرة ضمن الحدود الطبيعية على التوالي، بينما كان لدى مجموعة المرضى زيادة عالية المعنوية (33.42±15.08)،( 18.96±11.13) على التوالي. ووجدت الدراسة زيادة معنوية (P≤0.0001) في مستويات RF وAnti-CCP في عينات دم المرضى مقارنة بالسيطرة، وكانت قيم RF وAnti-CCP في المجموعة السيطرة طبيعية، بينما كان لدى مجموعة المرضى زيادة عالية المعنوية وتراوحت (72٪) و(64٪) على التوالي، في عينات الدم من مرضى RA .
ووجدت الدراسة ارتفاعاً معنوياً(P≤0.001) في مستويات TNF-α 121.79±40.80 في مرضى RA مقارنة بالسيطرة 63.28±21.25 بيكوغرام/ ملي لتر، وبناءً على مستويات الحركيات الخلوية وجزيئات الالتصاق. كما لوحظ ارتفاعاً معنوياً(P≤0.001) في متوسط ​​تركيز VCAM-1 في مصل دم مرضى RA مقارنة بمجموعة السيطرة، أذ بلغ متوسط ​​تركيزه في عينة المرضى127.18±26.15 نانوغرام/ ملي ليتر، بينما بلغ في عينة السيطرة 97.45±11.96 نانوغرام/ملي ليتر. وكان تركيز ICAM-1 في مصل دم مرضى RA أعلى بشكل ملحوظ (P ≤ 0.001) منه في المجموعة السيطرة، بمتوسط ​​تركيز51.86±4.91 نانوغرام/ملي ليتر مقارنة بـ 37.88±9.35 نانوغرام/ملي ليتر في السيطرة.
كما لوحظ لدى مرضى RA مستويات أعلى(P ≤ 0.001) بشكل ملحوظ منIL-37 مقارنة بمجموعة السيطرة، بقيم 45.66±13.94 مقارنة بـ 34.59±7.66 بيكوغرام/ ملي لتر، على التوالي. وفي مرضى RA ، كانت مستويات IL-39 في مصل الدم أعلى بشكل ملحوظ (P ≤ 0.001)، إذ وصلت القيم 115.77±20.15 مقارنة بالسيطرة 93.64±14.80 نانوغرام/ لتر، على التوالي .
ومن ناحية تأثير النمط الجيني للتعددات الشكلية المفردة لجينات الدراسة على الحركيات الخلوية وجزيئات الالتصاق لدى مرضى RA والسيطرة، وجدت الدراسة فروقًا كبيرة (P ≤ 0.001) لتعدد الأشكالrs1800610 G> A لدى الأنماط الجينية GG و GA فيTNF-α بين مرضى RA والسيطرة. وأظهر التحليل الإحصائي لتعدد أشكال rs3170794 وrs34199378 لجين VCAM-1اختلافات كبيرة(P≤0.001)عند التعدد الشكليrs3170794 ، لدى الأنماط الجينية TT و CT بين مرضى RA والسيطرة، وأيضاً اختلافات كبيرة (P ≤ 0.001) في مرضى RA ومجموعة السيطرة عند rs34199378، في النمطين الجينيين AA وGA. ومن ناحية أخرى، أظهرت النتائج في التعدد الشكلي rs868375367 rs5498، لجينICAM-1 ، وجود فروق معنوية (P≤0.001) فيrs868375367 ، لدى الأنماط الجينية GG و GC ، وأيضاً اختلافات كبيرة (P ≤ 0.001) في rs5498، بين مجموعة RA ومجموعة السيطرة لدى الأنماط الجينية AA و AG وGG، مع عدم وجود فروق معنوية بين الأنماط الجينية في مجموعة المرضى سواء أو مجموعة السيطرة لجميع التعددات الشكلية.
إن تحديد المستويات العالية من المؤشرات الحيوية للخلايا البطانية مثل VCAM-1 و ICAM-1، وتحديد كمية السيتوكينات الجديدة مثلIL-39 و IL-37 وTNF-α، واكتشاف SNPs المرتبطة بها يمكن أن يتنبأ بخلل وظيفي في الخلايا البطانية، مما يتيح تطوير خيارات العلاج لمرض التهاب المفاصل الروماتويدي