دراسة في كلية التربية للعلوم الصرفة تناقش التحري الجزيئي عن بعض جينات الضراوة لبكتريا Proteus mirabilis متعددة المقاومة المعزولة من عينات سريرية مختلفة
ناقشت كلية التربية للعلوم الصرفة جامعة ديالى اطروحة الدكتوراه الموسومة التحري الجزيئي عن بعض جينات الضراوة لبكتريا Proteus mirabilis متعددة المقاومة المعزولة من عينات سريرية مختلفة وعلى قاعة الندوات والمؤتمرات في الكلية .
هدفت الدراسة التي تقدم بها الطالب ابراهيم محمد عيسى واشراف الاستاذ المساعد الدكتور علي جعفر سليم والاستاذ الدكتور هادي رحمن رشيد الى التحري الجزيئي لجينات عوامل الضراوة لبكتريا Proteus mirabilis ذات المقاومة المتعددة ودراسة التأثير النانوي على التعبير الجيني لبعض جينات الانثيال.
تم جمع 250 عينة من مصادر سريرية مختلفة (التهابات المسالك البولية، الجروح، الخروج والحروق) في مستشفى بعقوبة العام ومستشفى البتول للولادة والاطفال في مدينة بعقوبة للتحري عن بكتريا المتقلبة الرائعه من كلا الجنسين، شكلت نسبة المرضى الذكور 44% والمرضى الاناث 56% تراوحت اعمارهم ما بين(شهر- 40سنة) ، توزعت بنسبة 72% للمرضى الراقدين و 28% لغير الراقدين.
استخدم وسط اكَار الماكونكي ووسط اكَار الدم لتنمية العينات وبعد نموها شخصت باستعمال الفحص المجهري والاختبارات الكميوحيوية بعد ذلك استخدم جهاز Compact VITEK2 لتأكيد التشخيص.
تم عزل 58 عزلة من بكترياspp. Proteus تضمنت 50 عزلة عائدة للنوع mirabilis Proteus و8 عزلة للنوع Proteus vulgaris، تم تقسيم عزلات بكتريا P. mirabilis بحسب موضع الإصابة اذ بلغت اعلى نسبة عزل من الإدرار وبنسبة 84%. بينت النتائج عدم وجود فروق معنوية في نسب الإصابة بهذه البكتريا من ناحية الجنس والعمر اذ شكلت 56% للإناث و 44% للذكور وكانت اعلى نسبة اصابة في الفئة العمرية (40-20) سنة .
أجري اختبار فحص الحساسية لـ50 عزلة تجاه 14 مضاد حياتي باستخدام طريقة Kirby -Bauer , اظهرت العزلات اعلى نسبة مقاومة لمضاد Doxycycline بنسبة 100% و88% لمضاد Cefepim و 84% لمضاد Amoxicillin-Clavulanic acid و 80 % لكل من Cefotaxime و Azithromycin و 78% Trimethoprim و60% لمضاد Gentamycinو56% لمضاد Aztreonam و 32% لمضادي Piperacycllin و Levofloxacin وCiprofloxacin%24 و و16% لمضاد Meropenemو10% لمضاديImipenem و Amikacin.
أُجري الكشف المظهري عن بعض عوامل الضراوة منها قابلية البكتريا على الحركة الموجية والاسواط وقدرتها على انتاج انزيم اليوريز وقابليتها على الالتصاق وكانت النسبة 100% ، كما تم الكشف عن قابليتها على انتاج الغشاء الحيوي بطريقة الانابيب وطريقة اطباق المعايرة وكانت منتجة وبنسبة 70% و76% على التوالي , وتم التحري عن قدرة البكتريا على امتلاك النصاب الحسي Acyl-Homserine Lactone حيث كانت 45 (90%) بينما 5 عزلات لا تمتلك النصاب الحسي ومصدرها الادرار والخروج .
تم استخلاص الحامض النووي DNA لـ20عزلة من عزلات بكتريا mirabilis. Pللكشف عن بعض جينات الضراوة وبعض جينات المقاومة وشملت جينات الضراوة جينات الاسواط flaA وfliC والجين المكون للأهلاب mrpA وجينات الانثيالrsbA و wosA وباستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل PCR وقد أظهرت النتائج عن وجود الجينات flaA و fliCوrsbA وwosA وmrpA في جميع العزلات وبنسبة 100% , اما جينات المقاومة للمضادات الحيوية جين aac(6)Ib-cr الذي يعطي مقاومة تجاه مضادات الكولينات و جين aac(3)Ia الذي يعطي مقاومة تجاه مضاد Gantamycin و جين blaCTXM2 الذي يعطي مقاومة تجاه مضاد Cefotaxim فقد كانت نسبة ظهورها في العزلات 35% , 20% و 100% على التوالي .
بينت نتائج تحليل تسلسل نواتج التضخيم للجينات rsbA , wosA لعزلتان من بكتريا P. mirabilis (11,12) مع تتابع العزلات القياسية المسجلة في المركز الدولي للمعلوماتية الحيوية NCBI وجود تشابهات تامة (100%) بالنسبة للجين rsbA وتشابه بنسبة 99% بالنسبة للحين wosA مابين تسلسلات العينات الخاصة لتجارب التسلسل مع الهدف المتوقع الذي يغطي جزءا من جيني wosA و rsbA في بكتريا Proteus mirabilis . سُجلت هذه العزلات في البنك العالمي للجينات وتم الحصول على رموز بنكية متخصصة لكلتا العزلتين وتم الحصول على الرمز الجيني ON944189 والرمز الجيني ON944190 واللذان قد تم تسجيلهما لتمثيل كل من العزله S1 والعزله S2 لجين wosA, والرمز الجيني ON944191 والرمز الجيني ON944192 واللذان قد تم تسجيلهما لتمثيل كل من العزله S1 والعزله S2 لجين rsbA.
بينت نتائج اختبار تاثير الدقائق النانوية للفضة ولاوكسيد الزنك على تعبير جينات rsbA و wosA المسؤولة عن ظاهرة الانثيال انخفاض التعبير الجيني للعزلات بعد المعامله مقارنة بالتعبير الجيني قبل المعاملة وبنسبة 1 قبل المعاملة و 0.44 بعد المعاملة بالنسبة للجين rsbA, اما بالنسبة لجين wosA فقد انخفض التعبير الجيني للعزلات حيث بلغ التعبير قبل المعاملة 1 انخفض الى 0.76 بعد المعاملة بالمادة النانوية .
